کلونینگ و بیان مناطق بالقوه آنتی ژنیک و اختصاصی پروتئین 3-3-14 فاسیولا ژیگانتیکا

پایان نامه
چکیده

فاسیولا ژیگانتیکا ترماتود معمول کبدی است که می تواند طیف وسیعی از میزبان های مهره دار را آلوده کند. اغلب در نشخوارکنندگان اهلی مانند گاو، بز و گوسفند یافت شده است. عفونت فاسیولا ژیگانتیکا باعث ایجاد خسارات اقتصادی در سراسر جهان می شود. تشخیص عفونت های فاسیولا بر پایه آزمایش مدفوع و شمارش تخم یا آزمایش های سرولوژیکی که بعضی از آنها بر مبنی شناسایی آنتی ژن است صورت می گیرد. در صورت جستجوی برخی ازآنتی ژن های خاص انگل تشخیص زود هنگام بیماری امکان پذیر می گردد. پروتئین 3-3-14 فاسیولا به عنوان یکی از آنتی ژنهای تشخیصی برای استفاده در آزمایشات تشخیصی و مطالعات مرتبط با واکسن می باشد. هدف از این تحقیق کلون کردن ژن 3-3- 14انگل فاسیولا ژیگانتیکا در وکتور pmal-c2x و بررسی بیان آن در اشرشیا کلی سویهtg1 بود. بدین منظور ابتدا توالی نوکلئوتیدی 3-3-14 فاسیولا ژیگانتیکا از منابع اطلاعاتی بانک ژن استخراج و مورد بررسی قرار گرفت تا پرایمرهای مناسب برای تکثیر این ژن در آزمایش rt-pcr طراحی گردد. سپس با استفاده از پرایمرهای طراحی شده ژن 14-3-3 با روشrt-pcr تکثیر گشت. عمل برش وکتور و ژن مورد نظر توسط آنزیم های تعیین حدود bamh i و hiniii و ecori و sali الحاق آنها به همدیگر با استفاده از آنزیم t4 لیگاز صورت گرفت. این ساختار سرانجام به باکتری e. coli سویه tgi منتقل شد و بیان پروتئین 3-3-14 با استفاده از روش -page sds بررسی گردید. نتایج حاصل از این تحقیق نشان می دهد که پلاسمید نوترکیب تهیه شده به خوبی موجب بیان این ژن می شود .

منابع مشابه

کلونینگ، بیان و تخلیص پروتئین SNAP-25

Background & Objectives:Clostridial neurotoxin inhibits neurotransmitter release by selective and specific intracellular proteolysis of synaptosomal associated protein of 25KDa (SNAP-25), synaptobrevin/VAMP-2 and syntaxin. SNAP-25 is one of the components that forms docking complex in synaptic ends. This protein is subtrate for botulinum neurotoxins types A,C, and E. Each of these toxin serotyp...

متن کامل

مقایسه فاسیولاهپاتیکا و فاسیولا ژیگانتیکا از لحاظ خصوصیات کاریوتیپی

در این مطالعه ابتدا 200 نمونه از انگلهای فاسیولاهپاتیکا و فاسیولاژیگانتیکا از کبد آلوده گوسفندان جدا گردید. پس از شستشو وتهیه سوسپانسیون سلولی،از سلولهای جنسی آنها با روش Air-dry گسترش کروموزومی تهیه شد ، پس از رنگ آمیزی با گمیسا،کروموزومهای دوگونه انگل از لحاظ کاریوتیپی مورد مطالعه و مقایسه قرار گرفت. طبق نتایج به دست آمده اسپرماتوسیتها به صورت روزت هشت تایی و اواوسیت ها به صورت انفرادی مشاهد...

متن کامل

کلونینگ و توالی یابی پلاسمید کد کننده پروتئین میکرونم 3 (MIC3) توکسوپلاسما گوندی

 سابقه و هدف: توکسوپلاسما گوندی، انگل تک‌یاخته درون سلولی اجباری و عامل توکسوپلاسموزیس در انسان و حیوانات بوده که در سراسر جهان انتشار دارد. پروتئین میکرونم 3 (MIC3) با وزن ملکولی 90 کیلو دالتون، عامل چسبیدن انگل به سلولهای میزبان در آغاز تهاجم است و در تمام مراحل تکاملی از انگل ترشح شده و یک آنتی ژن قوی محسوب می شود؛ از این نظر علاوه بر ایمونوژن بودن و کاندید ساخت واکسن، در تشخیص نیز کاربرد دا...

متن کامل

تخلیص و بررسی ویژگی های آنتی ژنیک پروتئین پوششی ویروس موزاییک خیار بیان شده در باکتری Escherichia coli

چکیده تخلیص انواع پروتئین­های بیان شده­ی ویروسی با اهداف مختلف از جمله تولید آنتی­بادی­های چند همسانه­ای و تک همسانه­ای، مطالعه­ی ساختاری آنها، شناسایی توالی آمینو اسیدی و توالی پپتیدی با استفاده از انواع روش­های کروماتوگرافی، صورت می­پذیرد که عموماً کاربرد چنین روش­هایی مستلزم صرف هزینه­ی زیاد می­باشد. در این تحقیق سعی شد پس از بیان ژن پروتئین پوششی ویروس موزاییک خیار، تخلیص و خالص سازی پروتئی...

متن کامل

تشخیص و افتراق سریع فاسیولا هپاتیکا و فاسیولا ژیگانتیکا با استفاده از روش loop-mediated Isothermal Amplification

Background and purpose: Fasciola hepatica and Fasciola gigantica are common liver flukes which affect both human and livestock worldwide. In this study we evaluated the loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assay for detection and discrimination of Fasciola species. Materials and methods: Fifty adults of Fasciola worms were isolated from sheep and cattle liver form abattoirs in Mazand...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید چمران اهواز - دانشکده دامپزشکی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023